Formatos disponíveisAssista a esse vídeo em: MP4 (1266 X 720 px) | MP4 (632 X 360 px) Show Licença de usoAcesso Simples (Azul) Esta licença permite ao usuário somente assistir ao conteúdo do e-Aulas USP na plataforma, sendo vedada sua cópia e/ou redistribuição. Esta licença não permite o download do vídeo por nenhum usuário. Sobre a aulaEste video descreve brevemente a ação de enzimas e a atividade que será desenvolvida no laboratório, a determinação da atividade enzimática da alfa-glicosidase presente no lisado de levedura. DisciplinaQBQ1453-3 Bioquímica ExperimentalEMENTAPreparação de lisado celular. Fundamentos da detecção, dosagem, separação e identificação de aminoácidos, proteínas, carboidratos e lipídeos que empregam colorimetria, espectroscopia, cromatografia, eletroforese, diálise e ensaios de atividade enzimática. Princípios e elaboração de
curvas-padrão. Determinação de concentração de atividade enzimática e de atividade específica. Determinação de parâmetros cinéticos de reações enzimáticas. Cálculos de recuperação e enriquecimento de atividade na purificação de enzimas. Determinação de estrutura primária de peptídeos e proteínas (enzimas). ObjetivoAmpliar o conhecimento em Bioquímica. Transmitir aos alunos os fundamentos teóricos de técnicas amplamente utilizadas na Bioquímica que exploram as propriedades físicas, químicas e funcionais dos carboidratos, lipídeos, aminoácidos e proteínas. Apresentar e trabalhar problemas experimentais relacionados a elas. Desenvolver a capacidade de planejar experimentos, selecionar técnicas e procedimentos para realizá-los, tratar e analisar criticamente os resultados obtidos. Índice de vídeos da disciplina
As enzimas são substâncias de natureza protéica, consideradas catalisadores biológicos, facilitando a ocorrência das reações, diminuindo a energia de ativação dos reagentes, também denominados de substratos enzimáticos, sendo essa energia o potencial inicial para desencadear uma reação. Normalmente os mecanismos orgânicos são lentos e pouco espontâneos, dependendo de enzimas específicas para promover e regular o dinâmico funcionamento metabólico. Portanto, consideradas unidades funcionais da catálise celular. Essas biomoléculas podem ser classificas segundo vários critérios. Contudo, o principal evidencia a afinidade e ação ao substrato: - Hidrolases → enzimas que associadas a moléculas de água, promovem a cisão (quebra) de ligações covalentes. - Ligases → enzimas que formam novas moléculas, unindo duas pré-existentes. - Oxidoredutases → enzimas que efetuam transferências de elétrons
(oxi-redução). - Transferases → enzimas que realizam translocação de grupos funcionais como grupamento amina, fosfato, carbonila e carboxila, de uma molécula para outra. - Liases → enzimas que atuam na remoção de moléculas de água, gás carbônico e amônia, a partir da ruptura de ligações covalentes. - Isomerases → enzimas que mediam a conversão de substâncias isoméricas, sejam isômeros
geométricos ou ópticos. Esses compostos possuem duas características importantes: a primeira relacionada à complementaridade enzima substrato (teoria da chave-fechadura); e a segunda relativa à restituição enzimática no final da reação, permanecendo intacta para reiniciar subseqüentes reações similares. Entre os fatores que influenciam a atividade enzimática causando sua disfunção, conseqüente desnaturação (inativação), está: a elevação e diminuição da temperatura ou pH, superior ou compreendendo um patamar de ação otimizada conforme atuação local de cada enzima (exemplo: pepsina produzida no estômago, degradando proteínas em pH ácido), bem como a concentração de enzimas ou substratos que podem aumentar ou diminuir a velocidade da reação, de acordo com a quantidade de enzimas e a ocupação de seus sítios de ativação. O que é atividade de uma enzima?O mecanismo de ação enzimática. As enzimas são substâncias de natureza protéica, consideradas catalisadores biológicos, facilitando a ocorrência das reações, diminuindo a energia de ativação dos reagentes, também denominados de substratos enzimáticos, sendo essa energia o potencial inicial para desencadear uma reação.
Como se determina a atividade de uma enzima?Para determinação da velocidade da reação catalisada por uma enzima, e calcular a atividade enzimática, a técnica experimental mais usual da cinética enzimática é o método das velocidades iniciais, que assume a cinética de estado estacionário.
O que é atividade enzimática e do que ela depende?A atividade enzimática é influenciada principalmente pela temperatura, pH e tempo. Vamos ver cada um deles separadamente. Temperatura: Seguindo o comportamento das reações químicas, a velocidade da atividade enzimática aumenta quando se aumenta a temperatura.
Como é e como atua uma enzima?As enzimas são substâncias orgânicas que participam de diversas reações químicas importantes para o funcionamento do organismo. Elas estão presentes no interior das células e atuam de modo a aumentar a velocidade dos processos químicos que garantem a vida. Essas substâncias possuem alto grau de especificidade.
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O que e a atividade de uma enzima?
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